1 概述
1.1風險評估：生化培養箱是微生物檢驗過程中使用頻次較多的重要設備之一，主要應用于細菌、霉菌及酵母菌的培養。其性能會受安裝情況、操作人員及方法、使用環境等因素的影響而變化，進而導致對藥品微生物質量的誤判。因此生化培養箱在實驗室設備搬遷完畢后，投入使用前**進行安裝、運行和性能確認。通過對其故障模式的影響因素進行分析評估，發現儀器文件是否完備、安裝條件、箱門的密封性、按鍵功能、溫度控制的準確度和精密度、報警器準確度等因素較為重要。對上述因素進行確認可以**大限度地降低生化培養箱可能導致的質量檢驗風險。
1.2設備描述及主要結構
LRH-250A型生化培養箱是由韶關市泰宏醫療器械有限公司生產，設有LED溫度數字顯示的生化培養箱，用于微生物限度檢查中霉菌及酵母菌的培養。
主要結構

序號	名稱	參數
1	箱體外形尺寸	530×585×1260mm
2	制冷系統	主要由壓縮機、冷凝器、毛細管、蒸發器等組成。
3	加熱器	100瓦
4	溫度控制系統	直流控溫電橋、加熱自動控制線路、制冷自動控制線路。
5	箱內氣流循環風扇	日本TOYO·FAN
6	箱內照明	8瓦日光燈
7	拖網	噴塑

 
 
1.3LRH-250A型生化培養箱工作原理
           箱內的感溫元件所感受的實際溫度轉換成電信號經放大器放大控制加熱器或制冷壓縮機工作當溫度高于所需溫度，直流電橋輸出負信號，經放大后，負于比較放大器輸入端的低電位，輸入端啟通，使繼電器工作，其常開觸點閉合，雙向可控硅g-A2極間短接，可控硅導通，制冷壓縮機工作，機器開始制冷，箱內溫度下降；當溫度低于所需溫度，直流電橋輸正信號，經放大后觸發脈沖發生器，是可控硅導通，加熱器截通電源，溫度上升。當溫度等于所需溫度，電橋平衡，無輸出信號，機器既不加熱，也不制冷，處于恒溫狀態。
LRH-250A型生化培養箱系統控制方框圖
 
 
 
1.4設備基本情況。
設備名稱：LRH-250A型生化培養箱
型    號：LRH-250A型
設備編號：023030365
生產廠家：韶關市泰宏醫療器械有限公司
供貨廠家：韶關市泰宏醫療器械有限公司
地址： 廣東省韶關市芙蓉東路4號
 
1.5LRH-250A型生化培養箱的規格和主要技術參數。

序號	名    稱	參    數	備    注
1	箱體外型尺寸（長×寬×高mm）	530×585×1260
2	公稱容積	150L
3	溫度波動允差	±0.5℃
4	溫度均勻性允差	±0.75℃
5	**大輸出功率	150W
6	電源電壓	220V±10％，50Hz
7	控制范圍	10～50℃
8	工作環境	0～40℃

2.驗證目的:
因設備新購進按照公司驗證**導小組的要求需對新購進的LRH-250A型生化培養箱進行安裝、運行及性能確認。通過LRH-250A型生化培養箱安裝、運行和性能進行檢查和確認，證明該設備各項性能指標設計符合要求，并能完全達到規定的技術指標和檢驗要求，以確認該設備對霉菌及酵母菌培養的適用性。 安裝確認主要檢查并確認LRH-250A型生化培養箱安裝后應符合使用和管理要求；同時檢查并確認LRH-250A型生化培養箱的安裝環境符合說明書條件提出的安裝要求，隨機文件均存在并保存完好。運行確認主要檢查和確認培養箱各單元的性能及整機運行符合標準的指標，工藝的要求，文件管理符合GMP管理要求。儀表儀器有合格證，并在校正期限之內。性能確認主要檢查和確認培養箱在空載和滿載情況下不同位置的溫度分布狀況，驗證培養箱運行時溫度均勻性。
3.驗證范圍
本方案適用于LRH-250A型生化培養箱安裝、運行、性能確認，并按方案中規定的范圍實施驗證確認項目。
4.職責：
方案的制定由****負責
數據的匯總分析、驗證報告的起草由趙****負責
方案的實施由****負責
檢測數據提供由****杰負責
方案中所需的相關設備證書由****負責
方案實施的組織監督由****負責
方案實施的過程監控由****負責
方案實施的協調工作由****負責
方案、報告的審核由驗證**導小組負責
對驗證小組成員進行驗證方案的培訓                           
 
培 訓 記 錄

培訓內容	培訓日期	講師	人員	簽字
LRH-250A型生化培養箱進行安裝、運行、性能確認驗證方案	2013.01.15

 
5.驗證項目
5.1 安裝確認：
5.1.1  目的：檢查并確認LRH-250A型生化培養箱安裝后應符合使用和管理要求；同時檢查并確認LRH-250A型生化培養箱的安裝環境符合說明書條件提出的安裝要求，隨機文件均存在并保存完好。
5.1.2 隨機文件以及附件確認內容
5.1.2.1 開箱檢查和資料附件的確認：
1）LRH-250A型生化培養箱的隨機文件的裝箱單確認LRH-250A型生化培養箱的規格型號、隨機附件及文件資料。
2）根據產品使用說明書，確認LRH-250A型生化培養箱的隨機文件的使用范圍是否符合設計要求。
3）文件資料進行清點、收集和保管。
5.1.2.2確認檢查結果記入下表
 
                        文件資料確認                         （附表一）

序號	文件名稱	確認內容及要求	測試結果	結果 達到√ 未達到×
1	LRH-250A型生化培養箱型號	LRH-250A
2	LRH-250A型生化培養箱名稱	LRH-250A型生化培養箱
3	出廠編號	有
4	設備驗貨記錄	有
5	使用說明書	有
6	產品合格證	有
7	產品測試報告	有
8	維修記錄卡	有
9	溫度校驗證書	有
結論:   確認人：                                               年    月     日 復核人：                                               年    月     日

 
5.1.3 安裝確認內容
5.1.3.1依據LRH-250A型生化培養箱安裝圖要求，檢查外接公共部分是否滿足要求。
5.1.3.2 依據LRH-250A型生化培養箱的技術要求，檢查外接電源。
5.1.3.3依據LRH-250A型生化培養箱位置布局圖，檢查設備的完整性。
5.1.4公共設施安裝確認檢查結果記入下表
                     公共設施的安裝確認                      （附表二）

序號	確認項目	確認內容及要求	確認方法	實際測量結果	結果達到√ 未達到×
1	環境溫度	18-24℃	溫濕度計
2	環境濕度	45-60%	溫濕度計
3	位置	放置于避光、通風的地方，設備外殼接地	按照化驗室設計圖紙的放置要求進行放置
4	電壓	220V±10％	采用電壓表測量，測量值在198-242V之間
5	頻率	50±5Hz	采用電壓表測量，測量值在50±5Hz之間
6	地面	平整光滑	目測
7	與墻壁距離	設備與墻壁**有10厘米以上距離	用卷尺測量
8	設備內清潔	干凈、無塵、無水汽	目測
9	整機外觀	外包裝無破損、設備表面平整光滑、無損傷及銳邊；涂漆表面色澤均勻、無起殼、脫皮現象。	目測，外包裝無破損、設備表面及外觀應符合確認要求
10	人員培訓	人員經過培訓	有培訓記錄
結論:        確認人：                                         年  月  日 復核人：                                         年  月  日

5.1.5  主要部件的安裝確認
      檢查和確認各主要部件的安裝質量和符合標準性，避免主要部件一旦損壞而導致安全或質量事故。
5.1.5.1主要部件質量確認
 
   主要部件安裝質量確認表          附表（三）

序號	確認項目	確認內容及要求	結果達到√ 未達到×
1	密封門	封閉性好，關閉時無縫隙
2	控制面板	安裝正確
3	加熱器	安裝正確
4	制冷系統	按電路圖安裝正確
5	風扇	風扇電機及風扇被固定，外觀完好
6	日光燈	外觀完好、起輝迅速、無閃爍、無噪音
7	拖網	外觀完好、無變形
8	開機顯示	溫度顯示正常
結論:           確認人：                                         年  月  日 復核人：                                         年  月  日

 
 
5.1.6 安裝確認結論：
以上LRH-250A型生化培養箱安裝確認的每一項內容是否與驗收標準相符合，匯總情況見下表：
 
安裝確認匯總表                      （附表四）

項     目	是否通過	確認人	復核人
文件資料確認
公共設施的安裝確認
主要部件的質量確認
結論:       確認人:                                               年   月    日 復核人:                                               年   月    日

 
如果在安裝確認中出現偏差，根據操作者、機器設備、物料、操作方法、環境條件等方面逐一查找原因，然后按照《偏差調查處理SMP》（****）進行處理，并填寫相關偏差記錄和說明。
5.1.8   在安裝確認后，依據產品說明書，制定設備運行確認操作規程，以指導LRH-250A型生化培養箱運行確認。在此基礎上修訂《恒溫培養箱使用SOP》。
5.1.9   LRH-250A型生化培養箱安裝確認報告。
      在進行安裝確認完成后，應立即收集安裝確認試驗數據， 準備安裝確認報告，并由驗證**導小組審查，并經**導小組組長批準，為下一步運行確認提供數據。
5.1.9.1 概述
5.1.9.2 LRH-250A型生化培養箱安裝確認測試總結。
5.1.9.2.1 LRH-250A型生化培養箱文件資料確認檢查（附表一）
5.1.9.2.2 LRH-250A型生化培養箱公共設施安全及安裝場地確認檢查記錄（附表二）
5.1.9.2.3主要部件質量確認表（附表三）
5.1.9.2.4 LRH-250A型生化培養箱安裝確認匯總檢查記錄（附表四）
5.1.9.2.5 LRH-250A型生化培養箱安裝試機操作程序
5.1.9.3結論。
5.1.9.4評價及建議。
5.2運行確認：
5.2.1 目的：檢查并確認新購進的LRH-250A型生化培養箱整機運行及各部件功能仍能符合設計要求，確認按該設備操作程序進行運行操作的可行性。
5.2.2  可接受標準：按LRH-250A型生化培養箱操作規程進行操作，檢查該生化培養箱進行中各部件運行狀況符合設計要求，控制系統正常工作，可實現系統的操作控制，設備運行系統無異常振動、噪音，各項技術指標符合設計要求。
安裝確認完成后，并且其中發生的偏差已關閉，進行運行確認。
應按下述項目依次驗證，通過后方可進行下一項目驗證，未通過應調試后從調試項目開始進行驗證。
5.2.3  運行確認方案
5.2.3.1  各主要部件運行確認
目的：檢查并確認各部件的運行情況符合設計要求。
主要部件運行確認記錄表                    （附表五）

項   目		標         準	檢查結果	結果達到√ 未達到×
操作測試	溫度設定	溫度可以更改并設定
	電熱裝置測試：設定溫度為40℃	溫度低于設定值時開始加熱并達到40℃
	制冷裝置測試：設定溫度為15℃	溫度高于設定值時開始降溫并達到15℃
設備報警測試	溫度偏高報警測試：設定溫度為15℃	此時室溫為22℃，將培養箱密封門打開，當溫度高于設定值1℃，報警啟動
	溫度偏低報警測試：設定溫度為40℃	此時室溫為22℃，將培養箱密封門打開，當溫度低于設定值1℃，報警啟動
校驗	溫度設定為25.5℃	設備顯示值和留點溫度計測量值比較溫度差值不能超過±1℃
結論：             確認人：                                    年    月    日 復核人：                                    年    月    日

        目的：檢查并確認整機運行情況符合設計要求                            
               
    整機運行確認記錄表                    （附表六）

項   目	標         準	檢查結果	結果達到√ 未達到×
整機	運行正常、無雜音，溫度可調，開關靈敏
結論：     確認人：                                    年    月    日 復核人：                                    年    月    日

5.2.4  在運行確認后，依照產品說明書，進一步修改并完成《恒溫培養箱使用SOP》以指導LRH-250A型生化培養箱的性能確認。
5.2.5  SOP的可行性確認
目的：確認操作者按照已批準執行的《恒溫培養箱使用SOP》并確定操作是否可行。
                           SOP可行性確認記錄表              （附表七） 

項目	標準	檢查結果	是否符合要求
操作規程	按《恒溫培養箱使用SOP》操作后，機器正常啟動、運行、停止。
結論：   檢驗人：                                           年   月   日 復核人：                                           年   月   日

5.2.6  LRH-250A型生化培養箱運行確認項目匯總
            LRH-250A型生化培養箱運行確認項目匯總表          （附表八）

項     目	是否通過	檢查人	復核人
各主要部件運行確認
SOP的可行性確認
整機運行確認
結論：     確認人：                                    年    月    日 復核人：                                    年    月    日

5.2.7 運行確認時間
     計劃2013年01月15日進行LRH-250A型生化培養箱運行確認
如果在運行確認中出現偏差，根據操作者、機器設備、物料、操作方法、環境條件等方面逐一查找原因，然后按照《偏差管理SMP》進行處理，并填寫相關偏差記錄和說明。
5.2.8LRH-250A型生化培養箱運行確認報告
在進行運行確認完成后，應立即收集運行確認試驗數據，準備運行確認報告，并由驗證**導小組審查并經**導小組組長批準，為下一步性能確認提供依據。
5.2.8.1  概述
5.2.8.2  LRH-250A型生化培養箱運行確認測試總結。
5.2.8.3  主要部件運行確認記錄表（附表五）。
5.2.8.4  整機運行確認記錄表（附表六）
5.2.8.5   SOP可行性確認記錄表（附表七）。
5.2.8.6   LRH-250A型生化培養箱運行確認項目匯總表（附表八）。
5.2.9 結論

 
5.3  性能確認
5.3.1 驗證目的
5.3.1.1驗證LRH-250A型生化培養箱能夠連續穩定運行，可以檢查和確認培養箱在空載和滿載情況下不同位置的溫度分布狀況，驗證培養箱運行時溫度均勻性。
5.3.1.2通過此驗證，對《恒溫培養箱使用SOP》進行修訂。
5.3.2范圍：
本驗證方案適用于：LRH-250A型生化培養箱按照《恒溫培養箱使用SOP》進行操作，對LRH-250A型生化培養箱性能進行驗證。
5.3.3進度要求：
             性能確認訂于 2013年01月15日**2013年01月17日
5.3.4驗證方法
5.3.4.1驗證用物品
5.3.4.1.1驗證用培養基平板的制備：
5.3.4.1.1.1滅菌的培養皿（Φ90mm）制備：將培養皿清洗干凈，經純化水潤洗后，用紗布包裹，然后再用牛皮紙包裹線繩扎緊，放入機動門電熱真空滅菌器內，并于121℃滅菌30分鐘后,經烤干,保存在培養室內,保存期為20天,并且應保證在驗證使用過程中都在滅菌的效期之內，如超出之后不再使用。
5.3.4.1.1.2滅菌玫瑰紅鈉瓊脂培養基制備：按照《玫瑰紅鈉瓊脂培養基配制SOP》 制備1000ml/瓶玫瑰紅鈉瓊脂培養基5瓶,共計6000ml，放入電熱真空滅菌器內，并于121℃滅菌15分鐘后,保存于冰箱(2～8℃)備用,保存期為20天, 并且應保證在驗證使用過程中都在滅菌的效期之內，如超出之后不再使用。
5.3.4.1.1.3滅菌玫瑰紅鈉瓊脂培養基平板制備：用恒溫水浴加熱器將滅菌的玫瑰紅鈉瓊脂培養基加熱融化，放冷**約45℃，傾于無菌平皿內，每個約15ml，共計400個,放置凝固后用牛皮紙包裹線繩扎緊后放在冰箱(2～8℃)備用,保存期為8天,并且應保證在驗證使用過程中都在滅菌的效期之內，如超出之后不再使用。
5.3.4.1.2驗證用餾點溫度計：使用校驗合格且在校驗期內的餾點溫度計,共計20個。
5.3.4.2培養箱內控制點的選擇：
采取十字交叉法每層取5點，5個點分別為4個角和中間一個點，共四層。（見控制點位置圖）。
                                 水平試驗點位置圖
                                                                                                                                          

×                     × 1（6、11、16）           2（7、12、17）                            × 3（8、13、18）           ×                   ×                 4（9、14、19）         5（10、15、20）

 
                     （前）
 
 
 
 
                      （后）
 
 
                                  
        垂直試驗點位置圖

×           ×          × 1（4）           3           2（5）

×           ×          ×    6（9）           8           7（10）

×           ×          × 11（14）          13          12（15）

×           ×          × 16（19）          18          17（20）

                             
 
5.3.4.3各試驗點（包括試驗點上的平皿）不得緊貼培養箱四壁，與培養箱四壁的距離不得小于5厘米。
5.3.4.4每層的高度不應小于25厘米。上層的溫度測量點距培養箱箱頂距離不得小于15厘米，下層的溫度測量點距培養箱箱底距離不得小于5厘米。
5.3.4.5培養溫度的選擇：根據中**藥典2010版規定，霉菌和酵母菌的培養溫度為23～28℃，故
培養箱的設定溫度定為25.5℃。
5.3.4.6溫度計的擺放：將溫度計垂直放置，溫度計的水銀球與試驗點距離約0.5厘米（如為滿載，則距離**高處平皿0.5厘米），關閉培養箱，待讀數穩定后讀取溫度計上的數值。
5.3.4.7過程監控參數和方法：

參數	檢測儀器	監控方法
溫度	留點溫度計	實測溫度與設定值（25.5℃）差的**值小于1℃

5.3.5驗證過程：
5.3.5.1空載下驗證培養箱能達到培養溫度且各部位的溫度均勻：在培養箱未放置平皿的情況下，將經過校驗合格的留點溫度計放置在各試驗點的位置,將培養箱設定培養溫度為25.5℃, 從溫度升**25.5℃開始計時,培養箱連續運行24小時，每2小時讀取溫度數據一次，共計讀取12組數據,將讀取的數據記錄附表之中。
5.3.5.2滿載下驗證培養箱能達到培養溫度且各部位的溫度均勻：在日常檢驗中，在培養箱內放置的平皿不超過3層，故驗證中以每層拖網鋪滿平皿且擺放5層平皿作為滿載條件，見平皿擺放圖, 將經過校驗合格的留點溫度計放置在各試驗點的位置,將培養箱設定培養溫度為25.5℃, 從溫度升**25.5℃開始計時,培養箱連續運行24小時，每2小時讀取溫度數據一次，共計讀取12組數據,將讀取的數據記錄附表之中。


 
5.3.6結果判斷：
5.3.6.1通過連續24小時,每兩小時讀取一次數據，共計讀取12組數據,并將讀取的數據填在驗證試驗結果表中（表格內容見附表九）。  
5.3.6.2若每組每個試驗點的溫度與設定溫度（25.5℃）的之差的**值小于1℃，則培養箱內各點的溫度是均勻的、穩定的。
5.3.6.3若每組每個試驗點的溫度部分或均未達到設定溫度（25.5℃）或溫度間差異較大（試驗點溫度之間**值超過1℃），則培養箱可能出現故障，建議維修設備后重新試驗。
5.3.7結論
5.3.7.1溫度驗證結果見報告。
5.3.7.2分析數據，綜合整個驗證過程，得出驗證結論。                   
5.3.7.3如果在性能確認中出現偏差，根據操作者、機器設備、物料、操作方法、環境條件等方面逐一查找原因，然后按照《偏差管理SMP》進行處理，并填寫相關偏差記錄和說明。
5.3.8使用的儀器、儀器校驗情況
    儀器校驗確認表

儀器名稱	測量范圍	檢定日期	有效期**	檢定結果
留點溫度計	0-100℃	2013.03.15	2013.03.15	合格

 
5.3.9建議：若設備停用半年以上或設備從上次驗證后使用滿2年時，均須對該設備進行再驗證。
5.3.10LRH-250A型生化培養箱性能確認報告
5.3.10.1 概述
5.3.10.2數據統計分析（附表九）
5.3.10.3結論
5.3.10.4評價及建議
6.結論
6.1 LRH生化培養箱安裝、運行、性能確認結果(見報告)。
6.2分析數據，綜合整個確認過程，得出確認結論。
6.3如果在安裝、運行、性能確認的過程中出現偏差，按照從操作者、機器設備、物料、操作方法、環境條件、測定條件等方面逐一查找原因，對偏差進行分析，并根據《偏差管理SMP》填寫相關偏差記錄和說明。
7.建議：
7.1若設備遷址，需重新對設備進行安裝、運行、性能的確認。
7.2若設備從上次驗證后使用滿2年時，均須對該設備進行性能再確認。
7.3建議每周對培養箱內表面進行清潔，經過兩年的正常使用后應對培養箱溫度進行校正。